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HE染色模糊不清怎么办?(灰染)

      苏木素-伊红染色(hematoxylineosin staining,HE 染色)是病理学中最常用、最基本的染色方法。与织物的染色方法建立过程一样,HE染色也是经时间摸索建立起来的。那HE切片染色模糊不清怎么办呢?原因有很多,我们借鉴了各专家观点,整理如下。

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贝安特HE高清恒染染色效果


1.组织固定不佳 可分为几种情况
(1)组织不新鲜:取材时已经出现腐败、自溶现象,取材后没有及时固定或固定液浓度不够染色都会造成组织结构模糊不清。由于组织结构变性,织酸化,染色切片星灰蓝色。
2固定液配制不规范:使用的固定液浓度过高,有的甚至用甲醛原液进行固定,这样就使蛋白质的沉淀和凝固作用太强,促使组织表面凝固迅速变硬,固定液渗透不到中间部位,造成固定不足,染色后出现模糊不清的现象。
(3)送检的标本用乙醇固定:乙醇固定沉淀的白蛋白,球蛋白不溶于水,但是沉淀的核蛋白可溶于水,因此会造成核染色不良,胞质染色也差,模糊不清。
补救参考:上述情况可以将组织用 10%中性福尔马林固定液重新固定,或切片脱蜡至水后用冷丙酮液再固定5~10分钟。


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2.固定前已经干涸的样本切片染色后在干涸的区域内也有成片的灰染现象,这种情况是很难补救的。


3.石蜡温度过高 包埋时,石蜡温度过高会使组织蛋白质发生质变,切片染色时染料与组织没有亲和力,发生拒染现象,也会造成染色模糊不清。
4.染料质量差或染色液配制失当 在配制苏木精时,如果加热氧化过度,就不能生成氧化苏木红(染色力最强),而生成四氧化苏木红(染色力弱),使染色液丧失染色能力(包括染色液使用过久),使切片着色模糊不清。可使用贝安特HE高清恒染,染色效果稳定恒定效果好,能避免染料不佳造成的问题。
5.分化过度 细胞核、胞质色泽较淡,模糊不清。
6.染色后脱水、透明不彻底 肉眼切片呈云雾状,显微镜下组织结构模糊不清。手工封片时口、鼻呼出的气体含有水分,阴雨天气潮湿封片动作不敏捷也会使切片呈云雾状模糊不清。
补救参考:可把切片退回到乙醇,更换二甲苯重新透明。


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贝安特高清恒定染色液


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      HE高清恒定染色液是一款能帮助您实现HE染色标准化的产品,它由稳定液、苏木素染液、伊红染液、返蓝液、分化液组成,不含氧化汞、甲醇等有毒有害试剂。染色效果清晰透亮,核质分明,染片色彩稳定耐久,可保证第1片到第5000片染色效果一致。

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