液基细胞学(TCT)检查是目前国际上较先进的一种宫颈癌细胞学检查技术，与传统宫颈刮片巴氏涂片检查相比，明显提高了标本的满意度及宫颈异常细胞检出率，是应用于妇女宫颈癌筛查的一项先进的技术。宫颈细胞学的常用染色方法以巴氏染色、HE 染色为主，效果各有优劣。
按照病理科不同制片方法，叫宫颈脱落细胞TCT制片法(英文ThinprepCytoiogicTesT)。TCT有三种制片方式：手工法、离心沉降法、TCT膜式法。今天，小编以贝安特产品为例，介绍手工法和离心沉降法的操作流程。
仪器材料
贝安特产的全自动液基薄层细胞制片机、贝安特TCT液基细胞学检测试剂套装。
方法
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妇科样本临床采样流程
首先，妇科医生用取样器在患者宫颈口取脱落细胞。接着，打开贝安特TCT液基细胞检测试剂套装，取出液基细胞保存液，旋开液基细胞保存液盖，用小刷子将病理取样置液基细胞保存液中漂洗，反复将刷子推至瓶底 10 次，用力使刷毛散开,最后快速旋转宫颈刷，以使采集到的样本尽可能地释放到保存液中,丢掉取样器,不可将刷头留在瓶内。接下来，密封好，标记，送检。
第一种制片方法是手工法，以下流程使用了贝安特TCT细胞学检测试剂套装，方法仅供参考。
手工浸染
一．手工浸染：准备浸染缸，按顺序标号：(1)清洗液,(2)缓冲液,(3)缓冲液,(4)苏木素染色液(5)缓冲液,(6)缓冲液(7)缓冲液,(8)清洗液,(9)清洗液,(10)EA/OG染色液,(11)清洗液,(12)清洗液,(13)清洗液,(14)异丙醇,(15)二甲苯。
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把制作好的细胞涂片转移到玻片架中,将玻片架按以上顺序依次在(1)至(13)号漫染缸中逐个漫泡,清洗液、缓冲液浸泡约1分钟,苏木素染色液,EA/0G染色漫泡约2分钟,依次在(14)至( 15)号漫染缸各浸泡数分钟;浸泡时应液面浸过整张玻片,并手提玻片架在试剂中上下抖动多次, 漫泡结束后应提起玻片架稍微干至无明显液滴时再放进下一个浸染缸。
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浸染结束的玻片用中性树脂和盖玻片进行封片固定、风干。
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按正常操作并对试剂加盖保护,试剂可多次使用，以上(1)至(15)号漫染缸每个170ml试剂, 能浸染100~150张细胞涂片,超过此数量应及时更换试剂。
手工滴染
二．手工滴染：除了本试剂，另准备异丙醇、二甲苯、中性树脂、盖玻片,以及玻片架
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向制片舱中加入1ml清洗液,静置1分钟后,倒去多余液体。
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水化:向制片舱中加入1m1缓冲液,静置1分钟后,倒去多余液体,重复此步骤2次，染核:向制片舱中加入0.5ml的苏木素染色液润洗,马上倒去,再向制片舱中加入1ml的苏木素染色液,静置2分钟,倒去多余染色液。
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返蓝:向制片舱中加入1ml的缓冲液,静置1分钟,倒去多余液体,重复此步骤3次。如制片舱内
壁挂有残留的苏木素染色液,应用吸水纸吸去,防止污染。
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脱水:向制片舱中加入1ml的清洗液, 静置1分钟,倒去多余液体,重复此步骤2次。
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染胞浆: 向制片舱加入0.5ml中入EA/OG染色液润洗, 马上倒掉, 再向制片舱中加入1mlEA/OG染液,静置数分钟后,倒去多余染色液。
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清洗:向制片舱中加入1ml清洗液,静置1分钟,倒去多余液体,重复此步骤3次。
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染色结束后,拆除制片舱,把制片依次放到玻片架中,马上把制片转移至异丙醇中漫泡数分钟,取出,马上转移至二甲苯中浸泡数分钟。
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从二甲苯中取出，封片。
离心沉降法
第二种TCT制片方法，离心沉降法，此处我们使用贝安特全自动液基薄层细胞制片机。
1.标注和振荡(混匀样本) 每份样本耗材(样本保存瓶离心管、载玻片)进行单独标注后,将样本保存瓶放入振荡器(3 000r/min,15~20 秒)振荡混匀样本。
2.转移标本 将转移架上耗材与样本对应放置好后，向每个离心管内加入4ml 的样本密度分离液,放入样本自动转移器(图 5 -4A)将保存瓶内样本转移至离心管内。
3.离心 将标本摇匀,加入约4-8m1的标本置于离心管中,然后放入离心机以转速1300转/分钟离心3分钟
4.吸去上清液8ml丢弃(离心管余下)
5.把离心管再次放入离心机,以转速2000转/分钟离心10分钟
6.准备和运行自动制片系统 将离心管架和载玻片架放入贝安特全自动液基薄层细胞制片机(下图),做好各类开机准备后,运行制片系统。
6.封片 制片染色完成后，去除残液,转移至无水乙醇后，二甲苯透明、封片。
染色结果
角化细胞呈粉红色，过度角化细胞呈橘黄色，角化前细胞呈浅蓝色或者浅绿色，细胞核呈蓝紫色。
注意事项
(1)染液染色时间为新染液时的理论染色时间,气温低、染液陈旧时，染色时间需要更长些夏天需时间短些
(2)苏木素在每日使用前需要用滤纸过滤
(3)各步水洗要充分，但不可用流水直接冲洗玻片
(4)无水乙醇脱水时间要充分,保证乙醇浓度,经常更换
(5)二甲苯要经常更换，若从无水乙醇到二甲苯时出现白色絮状物质,需要无水乙醇和二甲苯同时更换。
(6)更换二甲苯时染缸无须水洗,倾倒后用无絮清洁纸擦拭干净即可。若用水洗,则保证染缸擦拭至干燥状态。
TCT检查的适应症
A.用于宫颈炎的检查，可发现微生物感染，如真菌、滴虫、细胞、衣原体等。
B.用于宫颈癌及癌前病变的首选筛查。
C.疑似宫颈、宫颈管内的其它病变的筛查。
TCT宫颈液基细胞学检测试剂
贝安特自主研发的TCT宫颈液基细胞学检测试剂用于宫颈癌的筛查，能有效区分角化和非角化细胞，降低了假阴性率，提高了宫颈上皮高级别病变及浸润癌的阳性检出率，更有利于病理医生快速准确判读并且有利于AI分析，亦能用来做免疫组化及hpv分型检测，更好地守护女性宫颈健康。
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